ELISA方法測定單克隆抗體實驗原理及操作步驟一、實驗?zāi)康?.深入了解ELISA法測定抗體效價的原理。2.掌握ELISA法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的gao效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標記在抗體/抗原分子上，形成酶標抗體/酶標抗原，稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后，作用于底物使之呈色，根據(jù)顏色的有無和深淺，定位或定量抗原/抗體。ELISA法是免疫酶技術(shù)的一...

如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項有哪些呢?相信很多做實驗的小伙伴都有這樣的疑問,佰利萊生物就給大家總結(jié)一下；ELISA,全稱酶聯(lián)免疫吸附實驗,主要利用的是抗原抗體特異性結(jié)合的特點,可分為植接法、間接法、雙抗體夾心法、競爭法等。下面以間接法為例進行介紹:一、方陣ELISA。用途:（1）融合后確定鼠血清中抗體效價;（2）拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時先要確定包被原及抗體的優(yōu)質(zhì)工作濃度。經(jīng)典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結(jié)果O...

◆細胞為什么會衰老：1、過量的大分子交聯(lián)是衰老的一個主要因素，如DNA交聯(lián)和膠原膠聯(lián)均可損害其功能，引起衰老。2、細胞代謝產(chǎn)物積累至—定量后會危害細胞，導(dǎo)致細胞的衰老。3、自由基含有未配對電子，具有高度反應(yīng)活性，可引發(fā)鏈式自由基反應(yīng)，引起DNA、蛋白質(zhì)和脂類，尤其是多不飽和脂肪酸等大分子物質(zhì)變性和交聯(lián)，損傷DNA、生物膜和重要的結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白，從而引起衰老各種現(xiàn)象的發(fā)生。4、存在于細胞內(nèi)部提供能量的線粒體，其遺傳基因很容易發(fā)生突變，變異的積累很可能是人體老化的原因之—。細...

規(guī)格：50管/48樣丙酮酸脫羧酶（pyruvatedecarboxylase,PDC）活性測定試劑盒說明書紫外分光光度法注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。測定意義：PDC主要存在于酵母中，是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一，催化丙酮酸脫羧生成乙醛。測定原理：PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛，添加乙醇脫氫酶（ADH）來進一步催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340nm有吸收峰，而NAD+沒有；通過測定340nm光吸收下降速率，來計算PDC活性。自備儀器和用...

本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷牛（Bovine）α-乳清蛋白（α-La）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被α-乳清蛋白（α-La）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α-乳清蛋白（α-La）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O...

本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷植物（Plant）質(zhì)膜氫-ATP酶（H+-ATPase）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被質(zhì)膜氫-ATP酶（H+-ATPase）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的質(zhì)膜氫-ATP酶（H+-ATPase）呈正相關(guān)...

人白細胞介素6(IL-6)ELISA試劑盒的原理和操作方法檢測原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞介素6(IL-6)水平。用純化的人白細胞介素6(IL-6)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人白細胞介素6(IL-6)，再與HRP標記的人白細胞介素6(IL-6)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白細胞介素6(IL...

ELISA實驗加樣時通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。很多說明書、教科書上也都提到，加樣時要避免出現(xiàn)氣泡，這到底是什么原因呢？因為在做實驗的過程中，有時為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡，是不是這樣對實驗結(jié)果會后什么影響?原因：1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。2.包被時有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不完-全實際包被里下降―–弱陽性甚至假陰性。3.封閉時有氣泡的話，將導(dǎo)致大里...

ELISA試劑盒常見液體樣本處理方法1、血清:用無菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分〉，細心搜集上清，保存過程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。2、尿液:用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。3、血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求挑選EDT、肝-素-鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，細...

白介素試劑盒在免疫學(xué)研究中扮演著重要的角色。作為一種用于檢測和定量分析白介素的工具，它為科研人員提供了便捷和準確的方法，有助于深入了解免疫反應(yīng)和疾病機制。其原理是基于免疫學(xué)原理，通過特異性抗體與目標白介素結(jié)合來實現(xiàn)檢測和定量分析。一般采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）或流式細胞術(shù)等技術(shù)。試劑盒通常包括標準品、抗體、底物和檢測體系等組分，通過與目標白介素結(jié)合形成復(fù)合物，測定復(fù)合物的信號強度并與標準曲線進行比較，從而確定樣品中的白介素濃度。白介素試劑盒應(yīng)用范圍廣泛，包括以下幾個方...